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      • 制备用于smallRNA分析的RNA过滤库

      制备用于smallRNA分析的RNA过滤库

      • 发布者 一览
      • 分类 未分类
      • 日期 2020年3月12日
      • 评论 0评论

      small RNA测序之后,会得到很多不同类型的小RNA数据,其中包括我们常常并不感兴趣的RNA类型,比如rRNA区间产生的小RNA。
      有必要准备一个数据库,用于过滤掉这部分小RNA。
      做转录组分析时,我们用的一般是sillva库,因为主要是rRNA过滤。
      而小RNA数据分析,则不一样,除了rRNA,还有snoRNA,tRNA等。
      此时,rfam数据库可能是一个不错的选择。
      以下,是一年多以前的一个记录。

      操作流程

      # 准备一个Rfam库,仅不包含miRNA
      # 
      mkdir Rfam
      cd Rfam/
      # 
      wget ftp://ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/Rfam/12.1/fasta_files/*
      
      # 下载下来的是所有Rfam上的序列数据
      
      # 下面要做分类
      # 直接在浏览器下复制对应 归类 样本
      http://rfam.xfam.org/families
      
      # 保存在文件 Rfam_classification.xls
      cut -f3 Rfam_classification.xls |sort|uniq -c
          243 Cis-reg;
           28 Cis-reg; frameshift_element;
           30 Cis-reg; IRES;
           15 Cis-reg; leader;
           26 Cis-reg; riboswitch;
            9 Cis-reg; thermoregulator;
           79 Gene;
           27 Gene; antisense;
           11 Gene; antitoxin;
           64 Gene; CRISPR;
          217 Gene; lncRNA;
           530 Gene; miRNA;
           19 Gene; ribozyme;
           15 Gene; rRNA;
            3 Gene; snRNA;
          463 Gene; snRNA; snoRNA; CD-box;
          266 Gene; snRNA; snoRNA; HACA-box;
           18 Gene; snRNA; snoRNA; scaRNA;
           15 Gene; snRNA; splicing;
          384 Gene; sRNA;
            2 Gene; tRNA;
            9 Intron;
      
      # miRNA
      perl -F'\t' -lane 'print $F[1] unless $F[2]=~/Gene; miRNA;/' Rfam_classification.xls > Rfam_withoutMIR.ids
      # 
      for ID in `cat Rfam_withoutMIR.ids`;do zcat Rfam/$ID.fa.gz;done > Rfam_withoutMIR.fa
      # 
      bowtie-build Rfam_withoutMIR.fa bowtie-index/Rfam_withoutMIR

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