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      • 我写了一个R包,简化芯片的差异分析

      我写了一个R包,简化芯片的差异分析

      • 发布者 weinfoeditor
      • 分类 生信星球
      • 日期 2020年6月13日
      测试开头

       今天是生信星球陪你的第650天


         大神一句话,菜鸟跑半年。我不是大神,但我可以缩短你走弯路的半年~

         就像歌儿唱的那样,如果你不知道该往哪儿走,就留在这学点生信好不好~

         这里有豆豆和花花的学习历程,从新手到进阶,生信路上有你有我!

      1.由来

      近期由于工作需要,有大批的芯片数据等着我分析。我想着简化一下代码,一步到位出来差异分析结果。配合练习写R包,今天算是搞定了大头,分享一下给有缘人使用~

      目前差异分析仅支持二分组数据,多分组的后面再说~

      2.R包安装和准备

      我的包托管在Github上,并且依赖了曾老板写的AnnoProbe包,他的包也在github,所以没办法自动帮你安装,需要先安装好哦。

      /分割的是用户名和包名,知道了用户名,你就可以在github上搜索到包对应的页面啦。

      if(!require(AnnoProbe))devtools::install_github("jmzeng1314/AnnoProbe")
      if(!require(tinyarray))devtools::install_github("xjsun1221/tinyarray")

      github的包安装需要多折腾,实在折腾不了就放弃吧。如果仅仅是网络问题,可以使用本地安装,到github上下载这个包,下来放在工作目录下,然后:

      #devtools::install_local("tinyarray-master.zip",upgrade = F)

      只要有一些R包安装的基础知识和解决报错能力,就可以搞定啦。

      library(stringr)
      library(AnnoProbe)
      library(tinyarray)

      3.GEO数据下载

      rm(list = ls())
      options(stringsAsFactors = F)
      gse = "GSE4107"
      geo = geo_download(gse)

      写成了一个函数geo_download,默认使用AnnoProbe下载,如果报错就说明这个GSE没有被AnnoProbe收录,可以

      geo = geo_download(gse,by_annopbrobe = F)

      就会使用GEOquery下载了,如果网速实在堪忧,可以去GEO下载matrix.gz文件,放在工作目录下。

      4.得到表达矩阵和分组信息

      geo$exp = log(geo$exp+1)
      group_list = ifelse(str_detect(geo$pd$title,"control"),"control","treat")
      group_list = factor(group_list,levels = c("control","treat"))

      5.找探针注释信息

      结合两个来源,一个是bioconductor的包,一个是idmap。find_anno会返回可用的命令,复制下来运行即可。

      find_anno(geo$gpl)
      ## [1] "`ids <- toTable(hgu133plus2SYMBOL)` or `ids <- AnnoProbe::idmap('GPL570')` is both avaliable"
      ids <- AnnoProbe::idmap('GPL570')

      6. 完成差异分析及可视化

      把很多代码集成到了一起,得到的dcp是一个列表里面包括了差异分析结果表格,差异基因以及三张图。

      dcp = get_deg_all(geo$exp,
                        group_list,
                        ids,
                        logFC_cutoff = 1,
                        scale_before = T,
                        cluster_cols = F)
      ## [1] "362 down genes,1361 up genes"
      head(dcp[[1]])
      ##      logFC  AveExpr         t      P.Value    adj.P.Val        B    probe_id
      ## 1 4.755775 5.433371 15.686305 9.489229e-14 2.091036e-09 19.58011   202768_at
      ## 2 3.617970 7.889055 15.545324 1.147345e-13 2.091036e-09 19.43798   209189_at
      ## 3 2.808211 7.686054 14.835515 3.051878e-13 3.595391e-09 18.69553 201694_s_at
      ## 4 1.700875 9.251381 11.538846 5.019678e-11 3.920727e-07 14.57411 201041_s_at
      ## 5 3.146005 5.175579 10.617313 2.533831e-10 1.731715e-06 13.19062   223316_at
      ## 6 3.482923 4.763760  9.961547 8.508265e-10 4.651894e-06 12.13533   220276_at
      ##   symbol change ENTREZID
      ## 1   FOSB     up     2354
      ## 2    FOS     up     2353
      ## 3   EGR1     up     1958
      ## 4  DUSP1     up     1843
      ## 5  CCDC3     up    83643
      ## 6  RERGL     up    79785
      str(dcp[[2]])
      ## List of 2
      ##  $ upgenes  : chr [1:1361] "FOSB" "FOS" "EGR1" "DUSP1" ...
      ##  $ downgenes: chr [1:362] "NR1H4" "SLC51A" "NETO2" "ETNK1" ...
      dcp[[3]]
      我写了一个R包,简化芯片的差异分析

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      测试结尾

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